Step1: 典型性試驗(yàn)產(chǎn)品的型號選擇

注冊單元中包含多個型號，應(yīng)說明所選取的典型性試驗(yàn)產(chǎn)品的型號及選擇依據(jù)。如設(shè)計(jì)、材料和其他因素相似，可建立產(chǎn)品族，盡量減少再處理的確認(rèn)工作。即產(chǎn)品族中最難再處理的器械數(shù)據(jù)可涵蓋再處理難度等同或再處理更容易的器械。如果采用這種方法，應(yīng)評價(jià)產(chǎn)品族中再處理較容易的器械的所有設(shè)計(jì)特征。任何可能影響消毒劑或效力的設(shè)計(jì)或材料的變化都可能導(dǎo)致需要進(jìn)行重新確認(rèn)。

Step2: 消毒方式的選擇

應(yīng)評價(jià)消毒方式的適宜性，包括消毒因子的適應(yīng)性、對器械性能以及對器械材料的物理或化學(xué)方面的影響。例如，選擇高溫壓力蒸汽消毒時應(yīng)考慮壓力變形、熱塑等影響；選擇化學(xué)消毒劑，需考慮化學(xué)腐蝕、材料兼容、消毒劑殘留等影響。

Step3: 接種

測試微生物的選擇

根據(jù)不同的器械的預(yù)期用途、風(fēng)險(xiǎn)水平、消毒等級、消毒過程的抗力、器械自身生物負(fù)載的抗力等因素，應(yīng)確認(rèn)參考微生物的代表性。AAMI TIR 12中推薦使用典型繁殖體，例如：金黃色葡萄球菌、銅綠假單胞菌、大腸埃希氏菌和克雷伯氏菌屬的代表菌株，例如：肺炎克雷伯氏菌，來進(jìn)行低等級消毒確認(rèn)；使用低等級消毒的菌株和適宜的分枝桿菌屬菌株進(jìn)行中等級消毒確認(rèn)；使用適宜的分枝桿菌屬菌株進(jìn)行高等級消毒確認(rèn)。

接種部位的選擇

在選擇測試部位時可選擇整體進(jìn)行測試，也可以選擇最難處理的部位進(jìn)行確認(rèn)，難處理的部位包括：器械的內(nèi)部通道、鉸鏈、凹坑、有間隙的接頭、腔內(nèi)的軸、裂縫等。但監(jiān)管機(jī)構(gòu)可能會有例外情況，例如：FDA對于軟式窺鏡的要求是要對整體進(jìn)行測試。

Step4: 消毒過程確認(rèn)

接種后對產(chǎn)品進(jìn)行消毒，應(yīng)明確常規(guī)消毒方法和確認(rèn)用消毒方法。無論是常規(guī)消毒方法還是確認(rèn)消毒方法都應(yīng)當(dāng)有明確的過程參數(shù)，且確認(rèn)用消毒方法應(yīng)采用最低的過程參數(shù)，例如：最短時間、最低溫度、最低濃度等最不利的條件。

Step5: 洗脫

消毒后，對器械上潛在的微生物進(jìn)行洗脫。應(yīng)對洗脫效率進(jìn)行確認(rèn)，以確保在該洗脫方法下殘留的微生物可以被充分的洗脫。洗脫時所使用的洗脫介質(zhì)中可能需要加入中和劑，以中和洗脫液中潛在的消毒劑殘留，同時，應(yīng)當(dāng)確保添加的中和劑對微生物生長不會產(chǎn)生抑制。此外，還應(yīng)當(dāng)確認(rèn)使用的洗脫方法，例如，振蕩，超聲等是否會對微生物產(chǎn)生損傷。

Step6: 培養(yǎng)

洗脫后的收集液使用微生物限度濾膜進(jìn)行過濾，過濾后將濾膜置于相應(yīng)的培養(yǎng)基，在適宜的溫度下培養(yǎng)規(guī)定的時間。在經(jīng)過消毒處理后，潛在的未被殺滅微生物也受到了損傷，恢復(fù)所需要的時間可能會比其正常情況的培養(yǎng)時間要長。

Step7: 中和確認(rèn)

消毒確認(rèn)的同時，需要對中和劑的中和效果進(jìn)行確認(rèn)，避免由于中和不充分，而導(dǎo)致殘留的消毒劑在收集后到培養(yǎng)的期間持續(xù)發(fā)揮作用，進(jìn)而產(chǎn)生假陰性的結(jié)果。

Step8: 參考微生物的選擇及接受標(biāo)準(zhǔn)

AAMI TIR12: 2020 Designing, testing, and labeling medical devices intended for processing by health care facilities: A guide for device manufacturers對于高、中、低水平消毒的微生物選擇給出了建議。

高水平消毒：分枝桿菌。分枝桿菌的菌落數(shù)下降應(yīng)達(dá)到6個對數(shù)級；

中水平消毒：銅綠假單胞菌、金黃色葡萄球菌、大腸埃希菌、肺炎克雷伯菌、分枝桿菌。分枝桿菌需證明3個對數(shù)值的殺滅效果，其余細(xì)菌需證明6個對數(shù)值的殺滅效果；

低水平消毒：銅綠假單胞菌、金黃色葡萄球菌、大腸埃希菌、肺炎克雷伯菌。應(yīng)分別下降6個對數(shù)級。

注：對于每種微生物的消毒效果測試需單獨(dú)進(jìn)行，因?yàn)榛旌衔⑸锱囵B(yǎng)時會存在競爭抑制，從而導(dǎo)致比單獨(dú)進(jìn)行驗(yàn)證時更大的對數(shù)值減少。